福建省转基因水稻快速检测技术研究取得重要进展
导读:
该项目选取了BT类抗虫基因cry1Ac、cry1Ca、cry30FAa1基因,以及豇豆胰蛋白酶抑制剂基因cpti与潮霉素磷酸转移酶标记基因hpt,构建细菌表达载体并纯化了目的蛋白,制备了Cry1Ac、Cry1Ca、Hpt、CPTI蛋白的克隆抗体,进行了Cry1Ab、Cry1Ac、Hpt蛋白的单克隆抗体制备。
建立了胶体金标记检测试纸条技术体系,针对试纸条制备中胶体金颗粒的小,胶体金标记蛋白最适用量与pH值,不同膜材的选择,试纸条规格,包被液与胶体金重悬液组分等进行了优化,探索了最佳制备工艺,制备了Cry1Ac、Cry1Ca与CPTI的转基因检测试纸条,并制订了试纸条中试生产技术资料与检测说明书。
通过该技术制备的胶体金试纸条检测转cry1Ac与cpti基因水稻植株,与ELISA结果比较发现,Cry1Ac试纸条灵敏度96.0%,特异性为100%,符合率为96.1%;CPTI试纸条灵敏度为91.8%,特异性为94.8%,符合率为93.0%。为转基因水稻选育过程中的检测奠定基础。
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